Progetto attivo: miRALS

miRALS.
Svelare l'impatto dei microRNA sulla patogenesi della SLA.

Alterazioni di due geni correlati che codificano per proteine RNA-binding sono state recentemente individuate in pazienti con SLA familiare: il gene FUS / TLS a livello del locus ALS6 e il gene TARDBP/TDP-43 corrispondente al locus ALS10. Le mutazioni di questi geni confermano gli studi precedenti riguardo ad un processamento aberrante dell’RNA in pazienti ed in modelli murini di Sclerosi Laterale Amiotrofica (SLA), e suggeriscono fortemente che un anormale metabolismo dell'RNA possa contribuire alla patofisiologia della malattia. E 'particolarmente degno di nota che entrambe le proteine siano implicate nella biogenesi dei microRNA (miRNA). I microRNA sono piccole sequenze di RNA non codificante, che hanno la capacità di regolare l'espressione di centinaia di mRNA diversi. E 'stato dimostrato che i microRNA sono necessari per la sopravvivenza di specifici tipi neuronali maturi e studi recenti suggeriscono che la de-regolazione del network di controllo dei miRNA potrebbe essere la causa di diverse malattie del motoneurone.
Sulla base degli studi riguardanti le modificazioni nell’espressione dei miRNA in modelli murini SOD1 (G93A) di SLA e dei dati preliminari del nostro laboratorio, questo progetto verificherà in particolare l'ipotesi che la de-regolazione dell’espressione dei miRNA sia una caratteristica comune della SLA familiare.
A tal fine saranno utilizzate le linee cellulari umane di neuroblastoma che esprimono la SOD1 mutata (G93A) o due mutazioni del gene FUS legate alla SLA, come strumenti per indagare il ruolo dei miRNA nella SLA familiare. Lo scopo di questo lavoro è quello di capire se questi modulatori di espressione genica possano giocare un ruolo causale nell’insorgenza della malattia o nella sua progressione. In particolare, proponiamo di:
1. Caratterizzare su scala genomica l’espressione dei miRNA in cellule SH-SY5Y/SOD1 (G93A) attraverso il “whole-genome small RNA deep-sequencing”;
2. Iniziare la caratterizzazione funzionale dei miRNA trovati alterati;
3. Generare linee cellulari di SH-SY5Y che esprimano stabilmente la proteina FUS wild type o mutante e caratterizzarle per quanto riguarda l'espressione dei miRNA.
Complessivamente, il progetto proposto mira a migliorare la comprensione dei meccanismi molecolari sottostanti alla SLA familiare legata alle mutazioni di SOD1, con il fine ultimo di chiarire il ruolo dei miRNA nella degenerazione neuronale e di fornire nuovi bersagli per la diagnosi e la terapia della SLA.
 

Il Team di Ricerca:

E mail silvia.barabino@unimib.it

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